離心機對大豆油體富集物的分離作用
導(dǎo)讀:本文上海安亭科學(xué)儀器廠擬通過增加油體表面蛋白吸附量來使油體通過離心沉淀(該沉淀即為大豆油體富集物,蛋白質(zhì)含量比“USS”技術(shù)高),以此降低對離心設(shè)備的高要求,也可避開“
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發(fā)布日期:2019-12-27 10:42【大 中 小】
基于大豆油體在加工過程中與蛋白質(zhì)的相互作用,本文上海安亭科學(xué)儀器廠擬通過增加油體表面蛋白吸附量來使油體通過離心沉淀(該沉淀即為大豆油體富集物,蛋白質(zhì)含量比“USS”技術(shù)高),以此降低對離心設(shè)備的高要求,也可避開“USS”專利的技術(shù)壁壘。該方法主要基于大豆球蛋白、油體和大豆伴球蛋白的不同帶電性(球蛋白pI6.4,油體pI5.7,伴球蛋白pI4.8)。在一定的酸性pH下,油體與蛋白質(zhì)發(fā)生聚集形成粒徑較大的聚集體(油體-蛋白質(zhì)聚集體),可被低離心力離心沉淀,從而實現(xiàn)與其余未聚集蛋白的分離。此方法操作較為簡單,對設(shè)備要求不高,豆制品或大豆蛋白加工廠通過簡單的設(shè)備改造即可實現(xiàn)生產(chǎn),對我國大豆產(chǎn)業(yè)的發(fā)展具有重要意義。
1儀器與設(shè)備
MJ-60BE01B打漿機,美的電器有限公司;PHS-3C型pH計,上海精密科學(xué)儀器有限公司;離心機,上海安亭科學(xué)儀器廠;KDN-08型消化爐;海能K9840自動凱氏定氮儀;BE-210G電泳儀,日本Bio-Craft株式會社;Agilent1100型全自動氨基酸分析儀,美國Agilent公司。
2生豆?jié){的制備
大豆用去離子水清洗3遍后,4℃浸泡18h,用去離子水清洗2遍,按照豆水質(zhì)量比1∶9打漿2min。200目尼龍紗布過濾,得生豆?jié){。
3大豆油體富集物的分離
上海安亭科學(xué)儀器廠用2mol/LHCl調(diào)節(jié)生豆?jié){的pH至6.1、6.0、5.9、5.8、5.7、5.6、5.5、5.4,攪拌10min,5000g(離心力可以更小,本研究為了方便樣品的收集,選擇了較大的離心條件)下離心45min,得到兩相———上層液相和下層沉淀,分別收集。下層沉淀即為大豆油體富集物。
將生豆?jié){調(diào)至酸性pH后,通過離心將生豆?jié){分成大豆油體富集物和低脂大豆蛋白液兩部分。隨著pH降低,越來越多的脂質(zhì)和蛋白質(zhì)進入沉淀,液相中11S/7S比值越來越小,在pH5.5時,11S幾乎全部進入沉淀;液相中的谷氨酸和谷氨酰胺的相對含量越來越小,其余氨基酸相對含量與原始豆?jié){相差不大。在綜合考慮大豆油體富集物的脂質(zhì)含量和低脂大豆蛋白液的蛋白質(zhì)含量的情況下,本研究上海安亭科學(xué)儀器廠認(rèn)為pH5.9是較適的分離條件。在該條件下,可從100g生豆?jié){分離得到10g大豆油體富集物,其固形物含量約為22%,脂肪和蛋白質(zhì)含量都約為10%;相應(yīng)地,100g生豆?jié){可分離得到90g低脂大豆蛋白液,固形物、蛋白質(zhì)和脂肪含量分別為3.7%、1.6%和0.4%(本研究的原始生豆?jié){的固形物、蛋白質(zhì)和脂肪含量分別為5.6%、2.5%和1.4%)。
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