文中,上海安亭科學儀器廠分析了TGL-20bR離心機在尿液代謝組學分析中,所需要用到的儀器設備,并簡單的介紹了尿液內源性代謝物分析的方法。
1、材料 :
實驗動物48只SPF級雄性健康SD大鼠,體質量180-250g,均購自浙江省實驗動物中心,動物合格許可證號:SCXK(浙)2014-0001。
實驗用主要試劑和儀器:己烷、吡啶購自美國Thermo公司,甲醇與乙腈購自美國Tedia公司,1,2-13C肉蔻酸購自德國Sigma-Alorch公司,甲氧胺鹽購自德國Sigma-Aldtich公司,1%三甲基-氯硅烷的N,O-雙三甲基三氟乙酰胺購自BSTFA公司,超純水購自美國Millipore公司,尿素酶購自Sigma-Aldrich公司,刮痧板(水牛角MNJ-3412型)購自派朗公司,高速冷凍離心機購自上海安亭科學儀器廠生產的 TGL-20bR,Tracel310/TSQ8000 GC-MS儀購自美國Thermo公司,Savant SPD 1010 SpeedVac濃縮儀購自美國Thermo公司,Electric Von Frey test電子Von Frey購自上海玉研科學儀器有限公司,樣本均質儀購自美國Dragonlab公司,DMIL型倒置顯微鏡購自德國LEICA公司,TG-5MS毛細血管色譜柱購自美國Thermo,電子測痛儀(IITC 2390)購自Life Seienee Inc.,代謝籠由南京中醫藥大學動物實驗中心提供。
2、上海安亭 TGL-20bR離心機對尿液分析的方法:
尿液內源性代謝物分析,第9次干預結束禁食不禁水12h后,采用代謝籠收集每組大鼠24h尿液,并迅速保存至-80℃的冰箱內備用。代謝組學分析前,把解凍后的尿液樣本(37℃),置于上海安亭TGL-20bR離心10min后(4℃,12000 r/min),取其上清液200μL,加入30μL尿素酶溶液(30U)后,置于37℃孵育20min,加入內標有10μg的甲醇800μL,渦旋10min,最后再置于上海安亭 TGL-20bR中離心10min(4℃,12000r/min),取上清200μL,放于離心濃縮儀中揮干2h進樣。
以上就是離心機對尿液代謝物分析的方法,僅供大家參考,歡迎大家咨詢購買上海安亭離心機。