離心機在茄根多糖的提取分離中的應用

導讀:采用超聲波輔助提取，水提醇沉法析出粗多糖。精制后的多糖，采用苯酚-硫酸法顯色，以葡萄糖為標準品，利用紫外-可見分光光度法在490nm波長處測定吸光度，測定茄根中多糖的含量。

來源：未知發布日期：2019-09-26 14:56【大中小】

茄在我國廣泛分布和種植，一般茄子收獲完畢，茄根便當柴燒，對藥用資源是一種極大的浪費。上海安亭科學儀器廠通過文獻調研發現，對茄根的研究并不多，主要是對茄根中的酚類、生物堿、苯丙酸類等化合物進行提取分離、含量測定和藥理活性等方面的研究，但并未見對茄根中多糖的相關研究。本實驗上海安亭科學儀器廠就采用苯酚-硫酸法測定茄根中多糖的含量，為茄根藥材的質量控制提供參考依據。

1儀器
旋轉蒸發儀(型號:N-1300V型，生產廠家:東京理化器械株式會社);循環水式多用真空泵(型號:SHZ-DⅢ，生產廠家:上海科興儀器有限公司);電子分析天平(生產廠家:賽多利斯科學儀器（北京）有限公司);紫外可見分光光度計(型號:GoldS54，生產廠家:上海棱光技術有限公司);數控超聲波清洗器(型號:KQ5200DE型，生產廠家:昆山市超聲儀器有限公司);臺式電熱干燥箱(型號:202-2AB型，生產廠家:天津市泰斯特儀器有限公司);水浴鍋(型號:HH.S11-Ni2型，生產廠家:北京三二八科學儀器有限公司);臺式低速離心機(生產廠家:上海安亭科學儀器廠);純水儀(生產廠家:MILLIPOＲE)。

2方法
2.1茄根多糖的提取與精制工藝
樣品處理→脫脂→浸提→抽濾除渣→減壓濃縮→離心→乙醇沉淀多糖→靜止離心→粗多糖→復溶→脫蛋白→醇沉→干燥→精制多糖。

2.2工藝要點說明
樣品處理:將茄根除去雜質，置于恒溫干燥箱中烘干，粉碎備用。脫脂:稱取藥材5.0g，置于250mL具塞錐形瓶中，加入50mL石油醚，密塞后，振搖，超聲(40℃，頻率40kHz)提取30min，脫去其表面脂類物質，抽濾，晾干，重復脫脂1次。
浸提:脫脂晾干后試樣，以1∶20的料液比加入蒸餾水，在40℃水浴中超聲浸提30min，過濾后，在相同條件下重復提取1次。
抽濾除渣:將2次提取液合并，減壓抽濾。減壓濃縮:利用旋轉蒸發儀濃縮濾液，約至20mL，冷卻至室溫。
離心和醇沉:將濃縮液離心5min(5000r/min)，棄去沉淀后，緩慢加入無水乙醇(約3倍量)，不斷用玻璃棒攪拌，使多糖充分析出。靜置離心:將上述溶液靜置1d后，在上海安亭科學儀器廠離心機上離心得粗多糖沉淀。復溶和脫蛋白:粗多糖復溶，利用Sevage試劑除蛋白，連續操作到脫除蛋白質完全。
醇沉:在除去蛋白后的溶液中加入無水乙醇(3倍量)沉淀，依次用石油醚、丙酮、乙醇反復洗滌，離心，干燥，得精制多糖。

2.3樣品中多糖的含量測定
精密稱取茄根粉末5.0g，利用石油醚于超聲條件下脫脂2次，抽濾，將濾渣風干后加超純水超聲提取2次后，抽濾，合并2次濾液，濃縮后加3倍量無水乙醇，靜置過夜，離心，沉淀復溶，定容至100mL，搖勻，作為樣品溶液。吸取1.0mL，按照上述標準曲線操作步驟，測其吸光度。多糖含量(%)=樣品液中葡萄糖的濃度(mg/mL)×樣品液的稀釋倍數×測定液總體積(mL)/樣品的重量(mg)。

3結論
本實驗上海安亭科學廠采用超聲波輔助法對茄根中的多糖進行提取，用苯酚-硫酸法測其含量。在苯酚-硫酸法的條件下，測得茄根多糖含量平均為4.5%。該實驗的標準曲線線性關系良好，多糖含量測定結果穩定，重現性好，回收率高，說明苯酚-硫酸法可以用于測定茄根中多糖含量，具有一定的推廣和參考價值，同時也為茄根藥材的質量控制提供了參考依據。

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離心機在茄根多糖的提取分離中的應用

導讀:采用超聲波輔助提取，水提醇沉法析出粗多糖。精制后的多糖，采用苯酚-硫酸法顯色，以葡萄糖為標準品，利用紫外-可見分光光度法在490nm波長處測定吸光度，測定茄根中多糖的含量。

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